本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE

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什么是质粒？质粒是细菌或酵母等生物体内独立于染色体之外的小型环状DNA分子。它们通常携带一些非必需但对宿主有利的基因，比如抗生素抗性基因。 为什么要给质粒做电泳 质粒做电泳的核心目的在于验证提取的质粒是否完整、纯度如何，值不值得继续往下做实验，是所有下游操作前最廉价也最关键的质控步骤。 质粒电泳几条条带是正常的质粒电泳后看到几条条带，取决于质粒本身的构型、提取质量和电泳条件。 简单来说，最常见的答案是：在标准的琼脂糖凝胶电泳中，未经酶切的质粒通常会看到1到3条条带。 下面详细解释一下这些条带分别代表什么，以及为什么会看到不同数量的条带。 质粒的三种主要构型 超螺旋构型 结构最紧密，在凝胶电泳中跑得最快，位置最靠下。这是最理想、最完整的质粒形态。 开环构型 结构松散，在凝胶中受到的阻力最大，跑得最慢，位置最靠上。 线性构型 泳动速度介于超螺旋和开环之间，如果存在，会在超螺旋和开环之间。 除了最典型的三条带情况，根据质粒质量和实验处理，您可能还会观察到以下几种情况： 只有一条条带 通常是超螺旋条带：如果质粒...

大多数Oligo最终都是干粉形式，如果合成量足够多，能够在管子底部看到透明或类白色的薄片。通常建议配成浓度为100 μM母液保存，再稀释配制工作液使用。为什么不直接用母液去跑qPCR啊？ 刚好最近客户就有这样的情况，一开始他就是直接用100 μM的引物去跑的，结果给大家看看。 100uM的引物跑的（20ul体系上0.4ul的引物F和引物R） 一开始看到这样的图，我们也没搞清楚，怎么回事。去到实验室了解之后，才发现是直接用母液跑的qPCR。经过调整，结果如下。 10uM的引物跑的（20ul体系上0.4ul的引物F和引物R） 为什么不建议用100 μM的引物跑qPCR引物二聚体形成当引物浓度过高时，引物分子之间（尤其是正向和反向引物之间）相遇并互补结合的概率大大增加，即使它们与模板DNA并不完全匹配。酶会以这种“引物二聚体”为模板进行延伸，生成短小的、非特异性的PCR产物。 后果： 竞争资源：引物二聚体会与目标基因竞争反应体系中的DNA聚合酶、dNTPs等宝贵资源，导致目标产物的扩增效率下降。 荧光背景升高：在SYBR Green法中，染料会嵌入任何...

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与动物细胞不同，植物细胞具有坚韧的细胞壁结构，这个特性使得植物RNA的提取面临更大的技术挑战。信天翁植物RNA提取试剂盒新品上市，操作很简单，提取的 RNA 纯度高，gDNA 、蛋白和杂质残留少，下游做 RT-PCR、荧光定量 PCR 都稳

信天翁隆重推出优质转染试剂ezFect DNA transfection reagent适用于多种常见细胞转染效率可达 80%-90% 。不仅可以转染质粒DNA转染siRNA的效果也非常好。集赞送U盘、转染试剂，反馈再送积分

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在生命科学领域，科学家们一直梦想能够“透视”生物体的深层结构，观察细胞与组织的精细连接。组织透明化技术的诞生，让这一梦想照进现实。 一、什么是组织透明化？ 组织透明化（Tissue Clearing）是一种通过化学或物理方法去除生物组织中脂质、色素等吸光/散射物质，使其变得透明，从而实现对深层结构高分辨率三维成像的技术。简单来说，就是让不透明的组织变得像玻璃一样透明，让显微镜下的观察不再受限于切片厚度和位置。 来源文章：   二、组织透明化的原理 传统组织学研究依赖切片技术，但切片会破坏三维结构，且难以观察长距离神经连接或血管网络。组织透明化技术通过以下步骤突破这一局限： 固定组织：保持细胞结构完整。 脱脂处理：使用溶剂去除脂质（如脑组织中的髓鞘）。 折射率匹配：用特殊试剂（如水凝胶或有机溶剂）填充组织间隙，减少光散射。 荧光保存：优化处理流程以保留荧光蛋白信号，支持标记特定细胞或分子。 三、组织透明化的应用领域 这项技术为多学科研究提供了全新视角，以下是其核心应用场景：1. 神经科学：绘制“大脑...

流式细胞仪，是一种用于细胞分析的先进技术，能够实现细胞计数、表型分析、细胞周期检测以及细胞生存能力评估等功能。在流式细胞仪中，激光器发出的光照射到样品中的细胞时会被散射，这些散射光随后被检测器捕捉并转化为可供进一步分析和测量的信号。流式细胞仪工作原理？ 一个细胞仪会包含一个激光器、一个检测器和一个流体系统，确保细胞快速流过激光束。流式细胞仪的三个主要输出测量是正向散射、侧向散射和荧光信号。激光的可见光从每个细胞上反射，提供了细胞的一般大小和形状特征 正向散射FSC：指示细胞的大小正向散射（FSC）是沿激光传播方向产生的散射光，它能够反映细胞的大小。这种散射光是沿着激光路径进行测量的。当激光穿过细胞时，光线会在细胞两侧发生弯曲并产生衍射。因此，FSC的强度与细胞的直径密切相关，可以用来指示细胞的大小。 侧向散射SSC：指示细胞的颗粒度 侧向散射（SSC）是在与激光束呈90度角的位置测量的散射光，它能够反映细胞的颗粒度或内部复杂性。细胞内的结构会改变进入细胞的光波方向，使得细胞内的特定结构（例如颗...