流式细胞仪入门：FSC和SSC是什么？
流式细胞仪，是一种用于细胞分析的先进技术，能够实现细胞计数、表型分析、细胞周期检测以及细胞生存能力评估等功能。在流式细胞仪中，激光器发出的光照射到样品中的细胞时会被散射，这些散射光随后被检测器捕捉并转化为可供进一步分析和测量的信号。
流式细胞仪工作原理？
一个细胞仪会包含一个激光器、一个检测器和一个流体系统，确保细胞快速流过激光束。流式细胞仪的三个主要输出测量是正向散射、侧向散射和荧光信号。激光的可见光从每个细胞上反射，提供了细胞的一般大小和形状特征
正向散射FSC：指示细胞的大小
正向散射（FSC）是沿激光传播方向产生的散射光，它能够反映细胞的大小。这种散射光是沿着激光路径进行测量的。当激光穿过细胞时，光线会在细胞两侧发生弯曲并产生衍射。因此，FSC的强度与细胞的直径密切相关，可以用来指示细胞的大小。 
侧向散射SSC：指示细胞的颗粒度
侧向散射（SSC）是在与激光束呈90度角的位置测量的散射光，它能够反映细胞的颗粒度或内部复杂性。细胞内的结构会改变进入细胞的光波方向，使得细胞内的特定结构（例如颗粒和细胞核）对光线产生折射。因此，SSC信号越强，折射现象越明显，细胞内的颗粒度通常也越大。
把FSC和SSC作为纵坐标和横坐标作图，就可以获得初始的流式细胞散点图：
流式细胞散点图
认识完FSC和SSC后，有人可能要问FSC-A和FSC-H中的A和H分别代表什么呢？
当细胞通过激光束时，流式细胞仪会检测到一个光信号。随后，光电倍增管（PMT）将光信号放大并转换为电信号。从细胞进入检测点到离开检测点，电脉冲信号从0上升至峰值，再回落至0，仪器记录下这个峰值。其中，H（高度）表示脉冲信号的峰值；W（宽度）表示细胞通过激光检测区域所需的时间；A（面积）则是通过计算H和W得出的数值。
在进行流式细胞分析和分选时，如果存在过多的细胞黏连体，不仅会影响实验结果的准确性，还可能导致仪器管路堵塞。因为黏连细胞通过检测区域的时间更长，产生的脉冲面积也更大。因此，我们可以通过选择两个信号组合来识别并去除黏连体。
