流式实验主要步骤实验前准备根据实验需求选择合适仪器，准备过滤后的空白管、单染管和样本管，检查鞘液和废液桶状态上机操作按SOP开机，先用空白管调节FSC/SSC电压确定细胞群，再用单染管调节荧光通道电压并设置补偿，最后上样本管进行分析实验结束保存数据并备份模板，按SOP关机并维护液流系统特别提醒一下流式小白，电压参数是必须在上机预览样本的时候才能调节，一旦采集记录数据，电压无法更改。 一流式细胞仪为什么要调节电压？流式细胞仪的电压调节是实验中的关键步骤，直接影响荧光信号的检测灵敏度和数据准确性。这里说的调节电压其实是指光电倍增管（PMT）的电压。 流式仪器需要把细胞被激发的光信号转换成电信号，才可以被读取。这个过程就是由PMT来完成的。电压越高，单个光子转换成电子的数量就会越多，电压的调节会直接决定检测信号的强度。 当被荧光抗体标记的细胞进入流式细胞仪内通过激光束时，激发光会激发细胞上的荧光，从而产生相应的电压脉冲，这个脉冲的强度与PMT电压密切相关。 提高PMT电压可增强电流输出，从而放大信号...

实验室搬砖人请注意！ 还在为质粒大量提取耗时长、产量低发愁吗？ 每次大提等离心等过滤等到天荒地老 提完质粒天都黑啦！ GOONIE信天翁 400-204 无内毒素质粒大提试剂盒 省去过滤步骤，缩短离心时间 高效率快速提取质粒 做完质粒大提只要半个小时。 相较于业界常见的品牌（大约一小时），效率提升超40% 节省近一半时间 GOONIE质粒无内毒素大提优势1、采用新型高流速、高结合容量硅胶膜，显著缩短离心时间。步骤更简单，节省时间。 2、内毒素含量更低：优化了关键的去内毒素液配方，能特异性溶解并洗去硅胶膜上残留的内毒素（脂多糖），同时牢牢吸附目的DNA，产物的内毒素含量极低（＜0.1 EU/μg）。 3、更优的品质，更低的价格：降低20%的成本。 效果展示提取产物A260/A280比值稳定在 1.83-1.87 之间，接近理论最佳值1.8，表明蛋白质残留极低。 无论是高拷贝或低拷贝质粒都可以获得优秀的产量 产物的有机溶剂和盐残留被有效去除，纯度满足细胞转染、动物注射等无内毒素实验需求。 往期推荐不是吧？土壤/粪便提RNA也能这么简单！还不用氯仿！ 202...

本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE

本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE

慢病毒包装不会做？ 包慢病毒滴度不够高？ 感染效果不理想？ 试试我们的新品第三代慢病毒包装/感染/浓缩试剂盒 慢病毒（Lentivirus）也就是我们常说的Lenti！这是一种逆转录病毒，更为人熟知的HIV也是逆转录病毒。 其实实验室常用的慢病毒就是改造的失去毒性的HIV骨架。慢病毒能够感染分裂和非分裂细胞，可以将外源基因插入基因组，并长期稳定表达。 对于一些很难转染的干细胞，免疫细胞，使用慢病毒感染可以比较高效地传递目的DNA。不过慢病毒包装流程不简单，得到的病毒滴度纯度都会影响到下游的感染实验。 我们推出的这款 包装-增强感染-浓缩一站式慢病毒包装试剂盒， 和市面大部分慢病毒包装试剂盒不同， 我们除了包装用试剂，还配备了感染增强剂和浓缩液， 整合了包装、浓缩、感染 一次性配齐了慢病毒从包装到感染的全套试剂 帮你轻松解决感染不够高效，病毒滴度不够高的问题。 产品亮点采用优化后的第三代慢病毒包装系统，配备高纯度质粒和高效转染试剂，提升病毒包装效率； 含有感染增强试剂，提高病毒对难感染细胞的转导效率； 配备病毒浓缩液，快速...

在细胞实验的起步阶段，许多同学都会接到导师这样的任务：“这周把这个药物的浓度摸一下。” 面对这个看似简单实则关键的问题，新手往往感到无从下手。那么如何才能科学地确定一个药物的给药剂量呢？本文将为您系统梳理从文献调研到最终确定的完整流程。 一别瞎猜，先查文献！ 动手之前，先开电脑。查文献不是为了抄袭答案，而是为了找到你的“起点”。 怎么查打开PubMed。 输入关键词：你的药物名 + 你的细胞名 + "cell viability"（或cytotoxicity）。 看什么 重点看别人用了哪些浓度？处理了多久？ 查到之后怎么办 如果查到好多篇：你会看到一个大概的范围（比如10-100 μM）。记住，别直接用它！ 你要以这个范围为中心，上下多设几个浓度去做实验。 如果一篇都没查到：没关系！去找“同类药物”或“同类细胞”的文献，或者直接设一个超大的范围（从1 nM到100 μM）去探探路。 二实战！开始做第一个毒性实验 现在可以进细胞房了。 推荐方法：CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 法。其原理是通过水溶性四唑盐WST-8在活细胞线粒体脱氢酶作用下生成橙黄色甲臜...

加样不再怕出错！可视化qPCR Mix首单99多款好物29.9起信天翁生物带来9月专属福利，多款qPCR Mix、试剂盒、抗体限时超低价，助力科研进展。快来了解实用好物与专享价格，别错过本月实验采购的绝佳机会！01产品一：Fast Taq Template Visualization SYBR Green qPCR Mix货号：500-100加样可视化，384孔也不怕加错！原理：蓝色mix + 黄色模板 = 绿色，加没加模板一眼看清！适用：qPCR实验，支持大通量384孔板；原价360元 → 首单特惠仅99元（每人限购1份）；活动时间：9月17日--9月30日。注：黑龙江、吉林、安徽、贵州、重庆、海南暂不参与。02产品二：土壤、粪便RNA提取试剂盒货号：400-107广谱适用，强力祛除腐殖酸，操作更便捷！30分钟快速提取，无需低温离心；去除腐殖酸效果突出，优于多数进口品牌；适用样本类型：菜园土、发酵粪肥、塘泥、红土等；原价700元/10T → 宠粉尝鲜价29.9元（每课题组限1份）。活动时间：9.1-9.30活动地区：全国不限区域03产品三：10-180 kDa预染彩虹蛋白Marker货号：600-200条带清晰，分子量准确，电泳实验...

本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE

本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE

在qPCR实验前清除RNA中的gDNA，主要是为了确保qPCR检测到的信号完全来自于目标RNA（cDNA），而不是被残留的gDNA所污染，从而保证定量结果的准确性和可靠性。 逆转录原理图 qPCR原理图 qPCR如果不去gDNA会检测到什么？ qPCR的目标：定量检测特定的cDNA序列，该cDNA是由我们感兴趣的mRNA通过逆转录而来的。 但是基因组DNA（gDNA）也包含我们所检测基因的序列。 如果RNA样品中混有gDNA： qPCR的引物无法区分它们是要结合到cDNA上还是gDNA上。 引物会同时与cDNA和gDNA结合并进行扩增。 这样，最终检测到的荧光信号就是 “cDNA信号 + gDNA信号”的总和。 gDNA污染会直接导致定量结果出现严重偏差定量值假性偏高： 这是最直接的影响。检测的基因表达量会比实际值高，因为一部分信号来自于“背景噪音”gDNA。 数据失真，无法反映真实生物学差异： 假设你比较实验组和对照组的某个基因表达量。如果两个样品的gDNA污染程度不同（这在处理样品时很常见），那么你观察到的表达差异可能根...