做流式实验，是不是感觉像在玩一场超精密的“连连看”？想把不同的细胞标记都点亮，结果发现…… 染料选好了，仪器通道却对不上号？  或者，仪器配置单上写的都是“530/30”这种神秘代码，压根找不到“FITC通道”在哪？ 别慌！这几乎是每个流式新手（甚至老手）都会遇到的“入门礼包”。 今天这篇，咱们就掰开揉碎了聊聊这个流式配色的问题：如何给你的荧光染料，在仪器上找到通道。 新手第一步 一、先懂仪器再选染料 1、先懂仪器： 流式配色前，了解仪器配置（激光器，滤光片） 比如： 记录仪器的 激光器波长（如 405nm/488nm/561nm/640nm） 获取 滤光片参数表（例：APC通道 = 660/20nm 表示中心波长660nm，带宽20nm） 2、再选染料： 根据仪器可检测范围进行染料选择：弱表达抗原选择强荧光染料，强表达抗原选择弱荧光染料 原则①：优先不同激光激发的荧光染料，减少串色风险，如FITC/APC, PE/APC，原则②：每个检测通道只能对应检测一种荧光染料，避免信号重叠。也就是说，两种荧光染料是同一通道检测，则两者不适合同时使用，如BV421与eFl...

有没有试过做图发现数据组之间差异太大，作图不好看怎么办，显示了第一组数据，后面就几乎看不到了。 这时候可以给Y轴做一个截断。还是用到我们非常好用的作图工具graphpad！ 小红书：信天翁GOONIEBIO 像上次笔记教的那样填完数据以后，点击图表。我们可以看到一个图表初始的样子，第二组和第三组的数据被压缩得很厉害。 接下来我们开始做截断Y轴。 点击菜单栏更改里的这个图标。 点击选择左Y轴 选择截断成两段，可以选其中一种。有需要也可以截断成三段，选择three segment。 设置参数，我们看到框框里显示底部，这是指下面的参数是截断Y轴的下半部分的参数。 长度50%是指截断后下半部分Y轴占整个Y轴的50%。最小值跟最大值都是指截断后下半部分的Y轴的最大最小值。 我们的数据第一组是100以上，后面两组都是30以下，我们就可以将最大值调成30。 选择顶部就是上半部分的Y轴，一般它会自动调整，也可以自行调整参数。这里最小100，就是指截断以后，上半部分的Y轴会从100开始。 不需要改动以后可以选择确定。一个截断Y轴的图表就做好啦！ IP结果图怎...

之前一期，我们介绍过，提取出的RNA浓度在哪些范围比较合适。 经常有一些小伙伴在后台问，提取出的RNA浓度很低，还能不能往下做逆转录和qPCR，今天给大家介绍一下。 为什么提取出的RNA浓度低？ 以传统的trizol法提取为例，当RNA提取浓度低于预期（

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今天就给大家讲一下CCK8的标准曲线怎么做！放到其他所有需要拟合标曲的实验也是一脉相承的！快点码住吧！ 首先新建一个excel表格，按下图的方式输入细胞个数以及检测到的对应的OD值，如果做了复孔，就先计算平均值再输入。 点击插入，选择图表，选择散点图。 这个时候就会出现一个空白的长方形 把鼠标放到长方形里面，右键，点击选择数据。   点击添加，就会弹出一个小窗口。然后点击下图X轴框住的小箭头，拖动框住细胞个数的数据，同理选择Y轴框住OD值，点击确定。 散点图就出来啦 然后鼠标放到蓝色的数据点上，右键，选择添加趋势线。就会生成一条线性的趋势线。   鼠标放到右边，滚到最下面，把显示公式和R方选上，标曲就做完啦！其他实验的标准曲线也同理噢！   猜你需要 本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE...

在构建载体实验中，必不可少地用到感受态细胞。其实就是经过处理以后，使细胞膜通透性暂时增强的细胞。这个时候的细胞可以很容易地将外来的DNA或者RNA吸收到胞内。氯化钙处理是常见制备感受态细胞的方法。 将大肠杆菌进行低温处理，低渗氯化钙溶液会使细胞发生细胞膜胀大，细胞膜的磷脂双分子在钙离子的作用下发生变化，会使大肠杆菌变成感受态状态。 常见的感受态细胞可以自己在实验室制备，也有很多商业化的产品。   Jiang S, Li H, Zhang L, et al. Generic Diagramming Platform (GDP): a comprehensive database of high-quality biomedical graphics. Nucleic Acids Res. 2025;53(D1):D1670-D1676. doi:10.1093/nar/gkae973  常见感受态细胞总结01 DH5α感受态细胞DH5α 感受态细胞是分子实验室最常用的克隆菌株之一，转化效率高，适用于分子克隆及蓝白斑筛选，尤其适合扩增高拷贝质粒。DH5α 的recA1基因及endA基因突变，recA 基因编码ATP依赖型DNA重组酶，这个基因突变可以使转化到细胞里的DNA更稳定。野生型DH...