感受态细胞怎么选?DH5α、TOP10、Mach1、DH10B总结

作者: admin
发布于: 2025-11-28 10:20
分类: 实验方案


在构建载体实验中,必不可少地用到感受态细胞。其实就是经过处理以后,使细胞膜通透性暂时增强的细胞。


这个时候的细胞可以很容易地将外来的DNA或者RNA吸收到胞内。氯化钙处理常见制备感受态细胞方法

大肠杆菌进行低温处理低渗氯化钙溶液会使细胞发生细胞膜胀大,细胞膜的磷脂双分子在钙离子的作用下发生变化,会使大肠杆菌变成感受态状态

常见感受细胞可以自己实验室制备也有很多商业化产品

 

Jiang S, Li H, Zhang L, et al. Generic Diagramming Platform (GDP): a comprehensive database of high-quality biomedical graphics. Nucleic Acids Res. 2025;53(D1):D1670-D1676. doi:10.1093/nar/gkae973



 常见感受态细胞总结


01

 DH5α感受态细胞


DH5α 感受态细胞是分子实验室最常用的克隆菌株之一,转化效率高,适用于分子克隆及蓝白斑筛选,尤其适合扩增高拷贝质粒。

DH5α 的recA1基因及endA基因突变,recA 基因编码ATP依赖型DNA重组酶,这个基因突变可以使转化到细胞里的DNA更稳定。野生型DH5α 对常见抗菌素没有抗性。

02

 TOP10感受态细胞

TOP10 感受态细胞可以稳定复制拷贝质粒转化效率非常高于DH5α

生长速度涂板10小时即可看到菌落DH5α所需时间而且具有甲基化修饰能力可以用于克隆甲基化DNA但是TOP10 不含F质粒,不能进行接合转移。

03

 Mach1感受态细胞

Mach1感受态细胞生长速度非常快,生长速度快于上述两种细胞,涂板8
小时即可看到菌落生成
Mach1感受态细胞endA基因突变DNA稳定由于 tonA 基因型缺失Mach1感受态细胞对噬菌体T1和T5具有抗性

04

 DH10B感受态细胞

DH10B感受态细胞是一种高效的大肠杆菌来源于MC1061菌株,经过基因改造适合一些要求载体文库构建构建

市面上提供电转感受态和化学感受态两种规格这种感受态细胞转化效率非常适合用于制备 cDNA 或基因组文库而且适合克隆大质粒




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本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE
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