为什么要加loadingbuffer才能跑胶?不加可以吗?

作者: admin
发布于: 2025-11-28 10:12
分类: 实验方案


核酸电泳实验一般需要核酸上样缓冲液按照一定比例添加样品然后开启电泳大家有没有想过核酸要加loadingbuffer才能跑胶?




为什么要添加loading buffer才可以跑胶




01
 增加样品密度/比重

样品本身的密度通常低于电泳槽中的电极缓冲液如果直接将低密度的样品加入上样孔中,样品可能会漂浮、扩散,无法有效地沉入孔底,导致上样不均匀、样品溢出孔外甚至完全无法上样。

Loading Buffer 中含有高浓度的甘油或蔗糖,它们大大增加了样品的密度,使样品能够沉入上样孔的底部,形成清晰、集中的样品层。

02
 提供颜色指示

Loading Buffer 含有追踪染料比如GelRed

指示上样: 染料的颜色使操作者能清晰地看到样品是否被准确加入上样孔中,避免漏加或错加。

监控电泳进程: 通过观察染料迁移的位置,可以判断电泳是否正在进行以及大概的进度,避免样品跑出凝胶。

03
 保护核酸

很多核酸Loading Buffer含有低浓度的EDTA(乙二胺四乙酸)可以抑制DNase的活性,防止样品中的核酸在电泳前或电泳过程中被降解。

Buffer本身也提供一定的缓冲能力(通常pH在8.0左右),有助于维持核酸的稳定性。



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本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE
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