为什么一些荧光图是粉紫色？用的是什么荧光二抗啊？

作者： admin

发布于： 2025-11-28 10:12

分类：实验方案

粉紫色的荧光用的是什么荧光二抗啊？

你见过这种这种免疫荧光结果图吗？

这样的粉紫色

还有这样的粉紫色

我们先看看实验室常用的荧光二抗：

绿色：FITC、Alexa Fluor 488

红色：Alexa Fluor 647、Cy5

蓝色：DAPI（用于细胞核染色）

常用的荧光二抗好像没有什么粉色的荧光素啊，然后如果仔细看看文章的材料就会发现，作者用的也是这些普通的二抗，并没有什么粉色的荧光二抗。

那为什么这些结果图是粉色的呢？

他们大概率是显微镜图像处理软件生成的伪彩结果图。

荧光显微镜发射特定波长的激发光照射样品，样品中抗体的荧光分子吸收激发光的能量后，会跃迁到高能态，随后从高能态返回到基态的过程中，会以荧光的形式释放出能量，所以就会发射出一个荧光信号。

当这些荧光信号通过显微镜的物镜和滤光片系统后，被光敏元件捕捉。这些光敏元件会将荧光信号转换为电信号，并通过图像处理软件进行分析和处理。

为了更直观地展示荧光信号的强度和分布，软件可以将不同的荧光信号映射到不同的颜色上，这个颜色不一定是荧光真实的颜色。

为什么需要伪彩？

伪彩图像并非样品的真实颜色，但它能够提供一种直观且有效的视觉效果。比如说Alexa Fluor 647其实是一种远红光谱荧光，肉眼是不可见的，用电脑转换成可见的红色信号才能更好的观察。

Kondo N, Mimori-Kiyosue Y, TokuhiroK, Pezzotti G, Kinashi T. The autophagy component LC3 regulates lymphocyte adhesion via LFA1 transport in response to outside-in signaling. Nat Commun. 2025;16(1):1343. Published 2025 Feb 4. doi:10.1038/s41467-025-56631-1

Ligeon LA, Pena-Francesch M, Vanoaica LD, et al. Oxidation inhibits autophagy protein deconjugation from phagosomes to sustain MHC class II restricted antigen presentation. Nat Commun. 2021;12(1):1508. Published 2021 Mar 8. doi:10.1038/s41467-021-21829-6