转染(Transfection)是指将外源核酸物质(DNA或RNA)导入真核细胞内的过程,是分子生物学和细胞生物学研究中最基础也最重要的实验技术之一。广泛应用于基因功能研究、基因治疗研究等诸多领域。 例如,在研究某个特定基因过表达对细胞生长的影响时,我们可以将含有该基因的 DNA 构建到合适的载体上,然后通过转染技术将这个载体导入目标细胞,观察细胞生长的变化,从而判断该基因过表达的作用。 转染的原理物理方法 显微注射 :在显微镜下,利用微量注射器将 DNA 或 RNA 注入单个细胞。其原理是利用物理方式使细胞膜穿孔,让核酸进入细胞内部。 电穿孔 :利用电脉冲使细胞膜产生瞬时的微孔,从而使外源核酸能够通过这些孔隙进入细胞。 化学方法 比较常用的是脂质体转染和磷酸钙法,借助核酸和化学物质形成复合物,促进外源核酸穿过细胞膜屏障进入细胞内部发挥作用。 生物学方法 病毒载体介导的转染 :病毒具有天然侵染宿主细胞的能力。在病毒载体介导的转染中,构建包含了需要转染的DNA序列的病毒,然后通过病毒感染的方式将基因导入宿主细胞。 ezFect...