流式细胞仪作为细胞分析的核心工具，其运行稳定性直接影响实验成败。当仪器无法正常吸取细胞时，不仅会延误实验进度，还可能因反复排查消耗大量样本。本文将系统解析吸样失败的常见原因及解决方案。 一样本问题1.  细胞悬液浓度异常 a.  问题：细胞浓度过低吸样时负压不足，导致仪器反复“空吸”或触发报警。或过高细胞黏连成片，引发管路黏滞性堵塞。 ○ 隐藏风险：某些凋亡细胞或碎片即使浓度达标，仍可能因黏附性增强引发堵塞。 b.  解决：调整浓度，必要时用PBS稀释或离心浓缩。 2.  细胞团块或杂质堵塞 a.  问题： ○ 机械损伤：移液操作过于剧烈导致细胞破裂，释放DNA形成网状团块。 ○ 死亡细胞聚集：长时间静置样本中死细胞相互黏附。 b.  解决：使用细胞滤网过滤样本，常规用40 μm尼龙滤网；处理原代细胞或脆弱细胞时，可选用70 μm滤网减少剪切力。细胞离心后轻柔重悬，避免剧烈震荡。 （细胞滤网） 3. 样本管适配性差 a.  问题：非专用管（如EP管）规格不匹配，导致吸样针无法有效接触管底残留样本。 b.  解决：更换仪器适配的流式专用...

我们来探讨一个细胞培养实验中常见的问题：为什么在胰酶（Trypsin）消化细胞时通常会添加EDTA？  1胰酶是干啥用的 胰酶（Trypsin）是一种丝氨酸蛋白酶，主要功能是切割细胞表面或细胞间的蛋白质，从而解离贴壁细胞或分散细胞团。  2EDTA是什么？ EDTA（乙二胺四乙酸）是一种人工合成的金属离子螯合剂，化学结构具有六个配位位点，可强力结合二价阳离子（如Ca²⁺、Mg²⁺）  3为什么胰酶中要加EDTA？ EDTA与胰酶的协同作用是高效解离细胞的关键，具体原理如下： 破坏“离子胶水”： 细胞黏附依赖Ca²⁺（钙黏蛋白）和Mg²⁺（整合素），EDTA螯合这些离子，直接削弱细胞间及细胞-基质的连接。 暴露胰酶作用位点： 黏附蛋白（如Cadherin）的活性位点需Ca²⁺维持稳定构象。EDTA去除Ca²⁺后，蛋白结构松散，胰酶更易识别并切割靶点。 减少胰酶抑制： 血清或培养基中的金属离子可能抑制胰酶活性，EDTA通过螯合这些离子间接保护胰酶功能。 假设你要消化一种贴壁很牢的细胞（比如Hela细胞）： 只有胰酶：可能需要10分钟才能让...

在细胞实验研究中，CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种常用的细胞增殖和毒性检测试剂。然而，许多研究人员在使用CCK-8时，可能会遇到显微镜下细胞生长趋势与测得的OD值不一致的情况。这种现象不仅令人困惑，还可能影响实验结果的准确性。   Part 1  显微镜下细胞生长趋势与OD值不一致的可能原因 ① 实验操作 实验操作中的误差是导致显微镜下细胞生长趋势与OD值不一致的常见原因之一。例如，CCK-8试剂的添加量、孵育时间、混匀程度等操作步骤的不规范，都可能影响OD值的准确性。 此外，细胞接种密度不均匀也会导致不同孔之间的OD值差异较大。 ② 培养基和培养条件因素 培养基的成分和培养条件对细胞的生长和代谢有重要影响。如果培养基中的营养物质不足或存在抑制细胞生长的成分，可能会导致细胞生长受限，从而影响OD值的测定。 此外，培养箱的温度、湿度和CO2浓度不稳定，也可能导致细胞生长状态不一致，进而影响OD值的准确性。 ③ 细胞状态和药物影响 细胞的状态和药物的处理也是影响OD值的重要因素。例如，细胞在传代过程中可能出...

激光扫描共聚焦显微镜 英文名叫Confocal laser scanning microscope，平时听到师兄师姐说预约Confocal，就是预约共聚焦的意思。 共聚焦显微镜通常都单独放在空调非常猛温度非常低的房间里，显微镜的体型非常大，看起来就很贵，那么共聚焦显微镜跟普通的光学显微镜有什么区别呢？ 激光共聚焦显微镜 普通荧光显微镜 光源 采用激光作为光源 通常使用白炽灯、卤素灯等普通光源 分辨率 分辨率可提高40%以上，可以达到120nm甚至更高 分辨率相对较低 成像特点 光源是激光，通过激光扫描样品，不会照亮整个样本，只收集焦平面上的信号，肉眼看不到检测区有亮光。 采用宽场照明，工作的时候光源会把整个样本照亮，肉眼可以看到视野区有亮光。 成像模式 可以生成3D立体图像 只能获得二维的图像 图像处理 共聚焦显微镜需要配备电脑使用，会有专业的图像处理和分析软件，可以对样本进行三维重构等多种操作。 图像处理功能相对简单，主要依赖人工观察和分析 拍摄维度 激光共聚焦可以进行4维数据记录，在3D成像的基础上进行动态的数据记录。 只能静态拍摄 那有什么样本不适合用光...

在分子生物学和细胞实验中，高效的DNA转染是成功的关键步骤之一。信天翁生物科技推出的ezFect DNA转染试剂，以其90%以上的高转染效率和低毒性，成为科研工作者的得力助手。 无论是293T细胞的大质粒转染，还是Hela细胞的慢病毒感染，ezFect都能轻松应对，助您实验事半功倍  ezFect DNA转染试剂三大优势 高效转染，稳定表达转染效率高达90%以上，适用于多种常用工具细胞（如293T、Hela等）。 成功案例：13kb大质粒在293T细胞中的高效转染，以及慢病毒在Hela细胞中的稳定感染。 低毒性，非脂质体配方 采用非脂质体技术，显著降低细胞毒性，确保转染后细胞状态健康，实验结果更可靠。 操作简便，即开即用 即用型试剂，无需复杂配制，节省实验时间，提升实验效率。 识别下方二维码，可发起试用 本篇文章来源于微信公众号:信天翁GOONIE...

在阅读说明书或者protocol的时候，我们常常会看到离心的参数。有的说明书会写离心12000rpm，有的说明书会写离心12000×g，而离心机上写的又是rcf，那么关于 RCF、G 和 RPM 的这几个参数 ，他们具体代表了什么意思呢？   G（Gravity）  G 是地球重力加速度，其标准值约为 9.81 m/s²。在离心机的参数中，G 通常用于描述离心力的大小。比如，12,000×g的意思就是，离心力是地球重力的12,000倍。 RPM （Revolutions Per Minute）看英文名字很容易理解，RPM 是指离心机转头每分钟的转的次数。比如12000rpm的意思就是，离心机每分钟转12000次。 RCF （Relative Centrifugal Force） RCF 是相对离心力，它表示的是样本受到的离心力。一般会按样品的离心力是地球引力的多少倍来表示，通常会写成“×g”，例如，12000×g = 12000 RCF， 表示离心力是地球重力的 12000 倍。这个力的大小跟离心机的转数和离心机的半径有关  那么RCF跟RPM之间又有什么关系呢？ 这两者的换算可以用一个公式表示： RCF = (RPM)2 × 1.118 × 10-5 ×...