• 2025-11-28
    admin
    细胞凋亡(Apoptosis)是一个高度调控的细胞死亡过程,可以分为早期凋亡(Early Apoptosis)和晚期凋亡(Late Apoptosis)。 在凋亡过程中,细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(PS)会从内侧外翻到外侧,外翻后细胞膜可以被Annexin V结合标记信号。同时,随着凋亡的进展,细胞膜不再完整,核酸染料因此可以进入细胞内标记DNA。 流式细胞仪的结果分析软件可以自动计算每个象限中细胞的比例,从而得出正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞的比例。 Annexin V细胞凋亡检测试剂盒通常包含荧光标记物和核酸染料!荧光标记物在细胞凋亡的早期阶段,磷脂酰丝氨酸(PS)会从细胞膜的内侧翻转到外侧。Annexin V是一种与PS有高度亲和力的磷脂结合蛋白,通过将其与荧光素结合,如FITC、PE、AF647等,可以标记并检测这些外翻的PS,从而识别出早期凋亡的细胞。 1、 FITC(Fluorescein Isothiocyanate): FITC是一种常见的绿色荧光标记物,具有较高的荧光强度和稳定性,适用于多种实验条件。 2、PE(Phycoerythrin): PE藻红蛋白是一...
  • 2025-11-28
    admin
    在细胞生物学研究中,准确快速地评估细胞活力和增殖状态是至关重要的。亲爱的研究生小伙伴们,你是否在实验室里埋头苦干,为了等待细胞增殖结果而心急如焚?传统的MTT法虽然经典,但其操作繁琐、耗时长,已逐渐被新一代的CCK-8法所取代。  今天,我们要介绍的Goonie超敏型CCK-8试剂盒,则是全新升级的版本。 CCK8原理简析WST-8检测原理 CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一种基于WST-8的试剂盒,广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测。WST-8在电子耦合试剂存在的情况下,被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色甲臜产物(formazan),其颜色深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。 WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和...
  • 2025-11-28
    admin
    大家在跑qPCR时,有没有想过PCR仪为啥要105℃加热盖? 原因主要有以下这两点 最佳PCR仪为啥要105℃加热盖? 防止冷凝 PCR反应时,反应液一受热,就会蒸发成水汽。要是没有加热盖子,这些水汽就会在试管盖上变成小水珠,这样一来,反应液的量就减少了,实验可能就不准了。有了加热盖子,它比反应液温度高,水汽就不会在盖子上凝结,这问题就解决了。 保持温度稳定 加热盖子能让反应体系的温度保持得又均匀又稳定。PCR反应得在很精确的温度下进行,变性、退火、延伸这些阶段温度都不一样。加热盖子能防止热量从试管顶部跑掉,让反应液在整个反应过程中都能保持合适的温度。PCR仪使用注意 留足散热空间 仪器运行期间,需确保周围有足够的空间以便散热,各排风口20cm范围内应保持无遮挡,避免因散热不良影响仪器性能和使用寿命。 防止烫伤 仪器在运行及刚结束时,反应底座及热盖温度较高,切勿用手直接触摸,以免发生烫伤意外,待其自然冷却后再进行操作。 适用范围 PCR仪专门用于生物样品的扩增实验,严禁用于易燃易爆物品以及具有腐蚀性的样品加热,...
  • 2025-11-28
    admin
    信天翁GOONIE自2017年起航于广州黄埔科学城,作为生命科学领域的璀璨新星,我们秉承自主研发与持续创新的精神,专注于打造卓越品质、高性价比的生物试剂,打造具有全球竞争力的国产品牌。 面对市场需求的蓬勃增长,信天翁GOONIE现面向全国诚邀有志之士加入我们的经销商大家庭,共谋发展,共享辉煌! 关于我们独立研发,技术驱动 信天翁生物始终坚持自主创新,深耕技术研发,用硬实力为企业发展奠定基础。研发团队由加州大学博士领衔,聚集多位行业资深专家,覆盖基因检测、细胞检测、诊断试剂等多个领域。 发明专利数量超出10个,每一款产品都经过严格的质量把控和性能测试,确保高效、精准、稳定,为科研机构提供可靠的解决方案。 聚焦核心,产品线覆盖关键生物技术领域 我们的产品线聚焦于关键生物技术领域,包括: RNA提取试剂盒:基于离心柱法的高效提取技术,适用于多种样本类型,提取纯度高,稳定性强。 逆转录试剂盒:高效逆转录酶体系,确保RNA到cDNA的转化效率,为下游实验提供可靠模板。 qPCR试剂盒:高灵敏度和特异性的qPCR试剂...
  • 2025-11-28
    admin
    有没有遇到这样的情况,看到一个感兴趣的蛋白,想知道它在哪些细胞和组织中表达。 除了在文献库检索一篇篇地看文献,还可以利用数据库检索!! 给大家介绍一个很好用的蛋白数据库:THE HUMAN PROTEIN ATLAS。不需要注册就可以直接使用。 打开网页我们可以马上看到搜索栏,直接输入感兴趣的蛋白名称,我们以PD-L1为例,进行检索。 注意有的蛋白名字很多,它不一定会显示你最初输入的那一个名字, 如这里,显示的就是PD-L1的另一个名字CD274。 可以看到有的格子上面有绿色的半圆或者完整的圆形,圆形越完整,代表这个数据可信度越高。最可信是完整的圆形(enhanced),其次是3/4(supported),1/2(approved),1/4(uncertain)。 我们直接点击CD274进入详情页面,就可以看到很多详细的信息。首先网页默认进入summary的界面,我们可以看到CD274的基本情况,可以找到我们一开始输入的PD-L1是它的一个别名。 下面几个灰色的框可以查看基本情况。例如:Tissue profile可以看到PD-L1在组织的概况,主要在免疫细胞亚群以及滋养层细胞表达。...
  • 2025-11-28
    admin
    第一次做qPCR不会数据处理怎么办!?看这一篇就够了。 qPCR可以对目的基因进行绝对定量和相对定量,没有用标准品,而是用内参基因来计算相对表达量的qPCR属于相对定量。今天我们讲解的计算方法就是适用于相对定量的qPCR实验。  整个过程可以简单总结为: 1.计算目的基因和内参基因的ΔCt值:ΔCt = Ct(目的基因) - Ct(内参基因)。 2.计算处理组与对照组之间的ΔΔCt值:ΔΔCt = ΔCt(处理组) - ΔCt(对照组)。 3.计算相对表达量:2^(-ΔΔCt)。 当我们跑完qPCR程序的时候,记得保存一下工程文件,方便以后可以查看实验条件和曲线。我们在确认熔曲和扩增曲线没有问题以后,将数据输出成excel。 excel表格里会包含很多内容,不同的仪器导出的文件也会不一样,我们只需要找到有孔位置编号和CT值的两列保留即可.然后尽快把对应的孔代表的基因和样本标记好.  那么我们就会得到一个表格,be like 整理好以后,我们先计算三个复孔的平均值: 通过直接复制完成所有复孔的均值计算 接下来,对于每一个样本,我们用它的目的基因的平均ct值减去...