研0入门必看！3分钟快速看懂流式细胞仪检测结果

细胞凋亡（Apoptosis）是一个高度调控的细胞死亡过程，可以分为早期凋亡（Early Apoptosis）和晚期凋亡（Late Apoptosis）。

在凋亡过程中，细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（PS）会从内侧外翻到外侧，外翻后细胞膜可以被Annexin V结合标记信号。同时，随着凋亡的进展，细胞膜不再完整，核酸染料因此可以进入细胞内标记DNA。

流式细胞仪的结果分析软件可以自动计算每个象限中细胞的比例，从而得出正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞的比例。

在细胞凋亡的早期阶段，磷脂酰丝氨酸（PS）会从细胞膜的内侧翻转到外侧。Annexin V是一种与PS有高度亲和力的磷脂结合蛋白，通过将其与荧光素结合，如FITC、PE、AF647等，可以标记并检测这些外翻的PS，从而识别出早期凋亡的细胞。

最常用的是PI（碘化丙啶）或7-AAD（7-氨基-放线菌素D）。这些染料能够穿透受损的细胞膜（如晚期凋亡或坏死细胞），与细胞内的DNA结合，并发出荧光。

由于活细胞的细胞膜是完整的，这些染料不能进入活细胞内部，因此不会与活细胞的DNA结合，适合用来检测晚期凋亡或者坏死的细胞。

1.  左上象限：

这个象限的细胞被7-AAD标记但不被Annexin V-FITC标记，代表那些细胞膜已经受损但尚未发生PS外翻的细胞，可能是机械损伤的细胞或细胞碎片。

2.  左下象限：

这个象限的细胞既不被Annexin V-FITC标记也不被7-AAD标记，代表正常存活的细胞。

3.  右上象限：

这个象限的细胞同时被Annexin V-FITC和7-AAD标记，代表晚期凋亡的细胞或坏死的细胞。在晚期凋亡阶段，细胞膜的完整性已经受损，因此PI可以进入细胞内与DNA结合。同时，PS外翻仍然持续，所以Annexin V-FITC也可以与之结合。

4.  右下象限：

这个象限的细胞只被Annexin V-FITC标记而不被7-AAD标记，代表早期凋亡的细胞。在早期凋亡阶段，PS外翻但细胞膜的完整性尚未受损，因此PI不能进入细胞内。