分子生物学




激光扫描共聚焦显微镜 英文名叫Confocal laser scanning microscope,平时听到师兄师姐说预约Confocal,就是预约共聚焦的意思。
共聚焦显微镜通常都单独放在空调非常猛温度非常低的房间里,显微镜的体型非常大,看起来就很贵,那么共聚焦显微镜跟普通的光学显微镜有什么区别呢?

激光共聚焦显微镜 |
普通荧光显微镜 |
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光源 |
采用激光作为光源 |
通常使用白炽灯、卤素灯等普通光源 |
分辨率 |
分辨率可提高40%以上,可以达到120nm甚至更高 |
分辨率相对较低 |
成像特点 |
光源是激光,通过激光扫描样品,不会照亮整个样本,只收集焦平面上的信号,肉眼看不到检测区有亮光。 |
采用宽场照明,工作的时候光源会把整个样本照亮,肉眼可以看到视野区有亮光。 |
成像模式 |
可以生成3D立体图像 |
只能获得二维的图像 |
图像处理 |
共聚焦显微镜需要配备电脑使用,会有专业的图像处理和分析软件,可以对样本进行三维重构等多种操作。 |
图像处理功能相对简单,主要依赖人工观察和分析 |
拍摄维度 |
激光共聚焦可以进行4维数据记录,在3D成像的基础上进行动态的数据记录。 |
只能静态拍摄 |
那有什么样本不适合用光学显微镜,而需要用激光共聚焦显微镜呢?
需要拍摄三维结构的样本:适合需要检测多层结构的样本,激光共聚焦显微镜可以扫描重建三维结构,展示它们的空间关系。
需要记录动态变化的样本:激光共聚焦可进行动态观察,可以拍摄细胞的生长、迁移、代谢等过程
复杂荧光标记的样本:激光共聚焦显微镜能够同时观察多种荧光标记的物质,适用于研究多个抗体标记的样本。
需要准确定量分析的样本:使用激光共聚焦进行荧光定量相比普通显微镜会更加准确,共聚焦显微镜只收集焦平面上的信号,干扰信号会大大减少。
