为啥胰酶中要加EDTA？做实验前先搞懂3个作用

我们来探讨一个细胞培养实验中常见的问题：为什么在胰酶（Trypsin）消化细胞时通常会添加EDTA？ 

胰酶（Trypsin）是一种丝氨酸蛋白酶，主要功能是切割细胞表面或细胞间的蛋白质，从而解离贴壁细胞或分散细胞团。 

EDTA（乙二胺四乙酸）是一种人工合成的金属离子螯合剂，化学结构具有六个配位位点，可强力结合二价阳离子（如Ca²⁺、Mg²⁺） 

EDTA与胰酶的协同作用是高效解离细胞的关键，具体原理如下：

破坏“离子胶水”：

细胞黏附依赖Ca²⁺（钙黏蛋白）和Mg²⁺（整合素），EDTA螯合这些离子，直接削弱细胞间及细胞-基质的连接。

暴露胰酶作用位点：

黏附蛋白（如Cadherin）的活性位点需Ca²⁺维持稳定构象。EDTA去除Ca²⁺后，蛋白结构松散，胰酶更易识别并切割靶点。

减少胰酶抑制：

血清或培养基中的金属离子可能抑制胰酶活性，EDTA通过螯合这些离子间接保护胰酶功能。

 是否联用胰酶和EDTA取决于细胞类型——贴壁牢固的（如上皮细胞）需联用，松散或敏感细胞可单用胰酶或改用温和解离法。

实在不知道的话，可以查阅细胞株的官方培养指南（如ATCC、DSMZ），通常会注明推荐消化方法。