WB和qPCR结果趋势不一致？9种情况可自查

qPCR，即实时荧光定量PCR，主要用于检测基因的mRNA表达水平，从而了解该基因的转录情况。

WB，即Western Blot，是一种蛋白质检测技术，用于检测细胞或组织中特定蛋白的表达情况。主要目的是研究蛋白质的表达情况，包括蛋白质的是否表达，表达量多少，在不同样品中的表达差异。

两者分别检测的是RNA水平和蛋白水平，基因表达是一个复杂的过程，包括转录和翻译两个主要阶段，DNA通过转录变成mRNA，mRNA通过翻译变成蛋白质。

qPCR和WB是分别检测这两个水平的基因表达情况的技术方法，通过将两者结合使用，研究人员可以更全面地了解基因表达的情况，以及转录和翻译之间的关联。

通常情况下，qPCR和WB结果的数值或具体表达量不会完全相同，但在趋势上应该是一致的。

比如在qPCR实验中观察到某个基因的表达水平上调（即mRNA水平增加），那么在WB实验中，相应蛋白质的表达水平也应该呈现出上调的趋势。

同样地，如果qPCR显示基因表达水平下调（即mRNA水平减少），WB实验中蛋白质的表达水平也应该有类似的减少趋势。

但是有时候在实验中，有些人总是会出现qPCR和WB结果趋势不一致的问题，这是怎么回事呢？

1、mRNA水平不变 蛋白水平不变

基因表达处于稳定状态，没有显著变化。

2、mRNA水平增加 蛋白水平不变

可能存在转录后或翻译水平的调控，如mRNA的稳定性差、翻译效率低或存在miRNA的抑制作用。

3、mRNA水平降低 蛋白水平不变

可能存在“负反馈”调控机制，当蛋白水平高时，细胞可能通过降低转录来保持平衡。同时，蛋白的降解速率可能较慢。

4、mRNA水平不变 蛋白水平增加

可能由于翻译活动的增强或翻译后修饰（如蛋白稳定性增加）导致。

5、mRNA水平增加 蛋白水平增加

基因表达上调，转录和翻译过程均正常进行。

6、mRNA水平降低 蛋白水平增加

这可能是一个异常现象，但在某些情况下可能发生，如蛋白半衰期长，而mRNA合成迅速减少。

7、mRNA水平不变 蛋白水平降低

可能存在翻译后调控，如蛋白降解加速或miRNA导致的翻译抑制。

8、mRNA水平增加 蛋白水平降低

可能涉及多种调控机制，如mRNA的特异性降解、翻译抑制或翻译后修饰导致的蛋白降解。

9、mRNA水平降低 蛋白水平降低

基因表达下调，转录减少导致蛋白合成减少。