分子生物学




纯化柱可以去杂质
质粒提取试剂盒(特别是无内毒素质粒提取试剂盒)的核心是吸附柱。在结合和洗涤步骤中,缓冲液的设计使得只有质粒DNA能高效地结合到膜上,其他蛋白质、代谢物、盐离子等杂质会被洗掉。
细菌碎片和内毒素在这些步骤中也被有效地去除了。 即使你在有菌环境下裂解细菌,这些污染物也不会被纯化柱捕获,而是在弃去的滤液和洗涤液中。
乙醇洗脱
虽然裂解、中和等前期步骤在非无菌环境下进行,但通常会用含有70%-80%乙醇的洗液洗涤。这个过程能进一步去除盐分和杂质,并且乙醇本身就有杀菌作用。洗涤后,可以保证最终收集到的质粒溶液是无菌的。
耗材和溶菌液无菌
经过前面一系列的洗涤纯化,纯化柱的膜上基本已经不含有其他杂质,接下来只要保证洗脱过程中的洗脱液和接触的耗材是干净的,提取的质粒就是无菌的。
