ezFect DNA transfection reagent
非脂质体毒性低，常用工具细胞转染效率达90%
目录价
1820
货号：
100-505
规格：
1ml
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产品介绍
产品保存：
4℃储存，有效期12个月。长期不使用可置于-20ºC保存。常温运输。
产品简介：
本产品是新一代水溶性高分子，高电荷阳离子聚合物转染试剂，可与带负电荷的质粒DNA形成稳定的复合物，然后黏附到带有负电荷的细胞表面，透过细胞膜进入细胞内。本产品适用于把质粒DNA高效瞬时转染到贴壁或悬浮细胞中，可在含血清与抗生素的完全培养基中充分发挥作用。本试剂在转染大至13kb的质粒时，依然保持了高效率。
产品组成
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货号 |
组分 |
规格 |
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100-505 |
ezFect DNA transfection reagent |
1 mL |
产品特征
- 转染效率高，操作简便，毒性低，重复性好。对于大部分细胞系，如：HEK293T、HEK293F、 Expi293、 CHO和HeLa等，按照DNA用量(μg)和转染试剂(μL)的比例为1:1至1:2使用时，转染效率已达80%-90%。
- 兼容性好，转染可在有血清和抗生素存在的情况下进行，无需预先更换Opti-MEM®或其它无血清培养基。
- 转染试剂为化学合成产物，不含动物源成分(Animalorigin-free, AOF)。
- 本品已经22µm滤膜过滤除菌。
产品实测
细胞类型：293F
转染质粒：13kb质粒
转染条件：6孔板 转染10h，转染后36h观察
使用说明
（本说明书以6孔板，293T细胞为例）
1、接种细胞
转染前一天，将293T细胞接种在6孔板中，3×10^5~5×10^5每孔，使用含10%血清的DMEM培养
18-22小时。
2、转染过程
- 配置DNA稀释液（每孔）：将2µg质粒DNA加入100 μL无血清DMEM培养基中，涡旋混匀5秒或者用移液枪吹打20次。
- 制备转染复合物（每孔）: 向DNA稀释液中直接加入3μL转染试剂，涡旋混匀5秒或者用移液枪吹打20次，室温静置 20分钟（不宜超过30分钟）。
- 用移液枪将转染复合物分散滴入细胞培养孔中，轻轻摇晃6孔板以混匀。
- 转染10-16小时，除去旧的培养基，更换为2mL新鲜的含10%血清的DMEM培养基。
- 继续培养24到48小时，进行后续实验。
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细胞培养容器 |
培养基体积 |
稀释液体积 |
DNA 用量 |
转染试剂 |
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96-well 板 |
100 µL |
10 µL |
0.1 µg |
0.15 µL |
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48-well 板 |
200 µL |
20 µL |
0.2 µg |
0.3 µL |
|
24-well 板 |
500 µL |
50 µL |
0.5 µg |
0.75 µL |
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12-well 板 |
1 ml |
50 µL |
1 µg |
1.5 µL |
|
6-well 板 |
2 ml |
100 µL |
2 µg |
3 µL |
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6 cm 培养皿 |
4 ml |
200 µL |
4 µg |
6 µL |
|
10 cm 培养皿 |
10 ml |
500 µL |
10 µg |
15 µL |
注意事项
- 转染前细胞须处于良好的生长状态。 选用处于对数生长期、活力高、传代次数低的细胞可获得较佳的转染效果
- 质粒DNA的质量是转染成功的关键。建议使用高纯度，无内毒素质粒。质粒用量需根据细胞类型和具体试验条件而调整。
- 根据具体的试验条件和细胞类型，DNA(µg)/转染试剂(µL) 的比例建议在 1:1至1:4之间优化。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。6. 使用中遇到任何问题，请联系我们的技术支持。
