Fast First-Strand cDNA Synthesis Mix for RT(with dsDNase)
即用型预混Mix,去除99%gDNA污染
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本产品包含具有高温耐受性的逆转录酶及其反应所需的 Buffer、RNase 抑制剂、dNTPs、Oligo(dT)20VN、随机引物等主要成分,为 5×即用型预混 Mix,使用时只需加入 dsDNase 及其反应所需的Buffer、RNA 模板、水,使其工作浓度为 1×即可进行逆转录,得到的 cDNA 主要用于下游的 qPCR 实验。
本产品的逆转录酶是通过基因工程的方法将 M-MLV 基因进行特定功能改造,并通过大肠杆菌的重组表达而获得,该酶去除了 RNase H 活性,具有更高的温度耐受性,可进行高温逆转录,降低 RNA 的高级结构与非特异性因素对 cDNA 合成的不利影响。
使用步骤演示
产品组成
组分 |
规格(100T) |
货号 |
Fast First-Strand cDNA Synthesis Mix |
400 μL |
500-101A |
dsDNase |
1×100 μL |
500-101B |
10×dsDNase Buffer |
200 μL |
500-101C |
Nuclease-Free Water |
2×1mL |
500-101D |
储存条件
2~8℃保存,3个月有效;-20℃保存,两年有效。使用时尽可能避免反复冻融。
注意事项
1.包含 Oligo(dT)20VN 和随机引物,不仅适用于含有 Poly(A)结构的真核生物 mRNA,也适用于不含有 Poly(A)结构的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 等模板,但不适用于 miRNA 等小 RNA 模板。
2.待 Mix 完全解冻融化后方可使用,且使用过程前需上下颠倒混匀,不能涡旋或振荡混匀,避免产生过多的气泡。
3.RNA 的纯度和完整性都会影响 cDNA 的产量和下游的 qPCR 实验结果,因此,尽可能使用试剂盒来提取 RNA。