普通植物总RNA提取试剂盒

11分钟快速提取

0苯酚0氯仿

目录价
720
货号:
400-106
规格:
50T
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广谱适用

强力去除腐殖酸

 
 

 

 

货号:400-106

 

产品保存

室温(15-25℃) 运输保存,保质期为一年。

 

产品简介

本试剂盒适用于从简单植物组织中快速提取总RNA 。可以进行各种简单的植物组织(如水稻、小麦、玉米、拟 南芥、本生烟等植物幼嫩组织)的RNA提取。本试剂盒提取过程中无需使用酚氯仿、β-巯基乙醇等有毒试剂,

也无需耗时的醇类沉淀,整个提取过程只需11分钟。本试剂盒中的特异性gDNA清除柱能有效地去除杂质和   gDNA ,RNA结合柱能高效地结合RNA ,同时配备优化后的Buffer ,可以得到高纯度的总RNA 、且gDNA残留  少、无蛋白和其他杂质污染。RNA产物可用于RT-PCR 、荧光定量PCR 、RNA建库、芯片分析、Northern Blot、 Dot Blot和分子克隆等多种下游实验。

 

效果实测:

样本

样本量(mg

洗脱体积(μl

A260/A280

A260/A230

浓度(ng/ul)

得率μg/mg

烟草

75

60

2.169

2.241

563.428

0.45 

黄瓜

73

60

2.138

2.429

370.856

0.30 

花叶万年青

76

60

2.071

1.573

187.405

0.15 

龟背竹

100

50

2.062

2.328

271.424

0.14 

拟南芥

100

30

2.09

2.262

656.911

0.20 

大豆茎

100

30

2.049

1.979

305.634

0.09 

玉米叶

30

30

2.122

2.218

514.922

0.51 

大豆根

80

30

2.108

2.058

372.614

0.14 

 

 

 

产品组成

产品编号

组分

50次)

400-106A

Lysis Buffer

40 mL

400-106B

CB  Buffer

20 mL

400-106C

Wash Buffer

12 mL

400-106D

Elution Buffer

10 mL

400-106E

gDNA清除柱(含收集管)

50套

400-106F

RNA结合柱(含收集管)

50套

 

 

实验前准备事项

  1. 第一次使用前,必须向CBBuffer 中加入 20 mL 无水乙醇,并充分摇匀。
  2. 一次使用前,Wash Buffeer中加入48 mL 无水乙醇,并充分摇匀。
  3. 首次使用建议先将Elution Buffer 在超净工作台小份分装。

使用说明

  1. 样本处理

称取 50~ 100 mg 植物组织,加入液氮后用研钵磨成粉末,或液氮速冻后用冷冻研磨仪快速将样品研磨成粉末。 研磨应尽可能充分快速,并保证低温,以防止 RNA 降解。

  1. 样本裂解

迅速向研磨好的植物样品粉末中加入 600 μL 的 Lysis Buffer ,剧烈涡旋振荡 30 秒,使样本与裂解液充分混合 均匀,然后 13,000 × g 室温离心 5 min。

  1. gDNA去除

弃去沉淀,将上一步离心后的上清立即转入 gDNA 清除柱(清除柱先套入收集管中),13,000 × g 室温离心 30 秒。产物在收集管中,保留收集管中的滤液。

  1.  RNA结合

向收集管中加入 0.5 倍滤液体积的无水乙醇,用移液器吹打 6-8 次混匀,然后将混合液转入 RNA 结合柱(结 合柱先套入收集管中),13,000 × g 室温离心 30 秒。

  1. 柱清洗

1) 弃滤液,向 RNA 结合柱(含收集管)中加入 700 μL 的 CB Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙 ),13,000 × g 室温离心 30 秒。

2) 弃滤液,向 RNA 结合柱(含收集管)中加入 500 μL 的 Wash Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙 ),13,000 × g 室温离心 30 秒。

3)重复上述步骤 2)一次。

4) 弃滤液,将 RNA 结合柱放回收集管。13,000 × g 室温空管离心 1 分钟。

  1. RNA 洗脱

1) 弃收集管,将 RNA 结合柱转入新的 1.5 mL 的 RNase-free 离心管中,超净台最大风速开盖晾干 1 分钟。

2) 向吸附柱膜中央悬空滴加 30 - 100 μL 的 Elution Buffer ,13,000 × g 室温,离心 1 分钟。1.5 mL 离心管 中产物即为 RNA 产物,立即进行下游实验或置于-80℃保存。

 

 

注意事项

  1. 请选用质量良好的离心管耗材,防止离心管在实验过程破裂或试剂溅出。
  2. 为保证提取质量,建议全程使用无RNA酶的试剂耗材,尤其是 RNA 洗脱步骤。
  3. 对于珍稀样本或不确定提取效果的难提样本,正式实验前,请使用少量样本进行预实验,以确定提取效果。