分子生物学
11分钟快速提取
0苯酚0氯仿
RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR (probe)kit
无需额外提取RNA
10个细胞可直接测qPCR
RNAflash DCA(Direct Cellular Amplification)one step RT qPCR (SYBR Green)kit-MAX
无需额外提取RNA和逆转录
10个细胞可直接测qPCR
RNAflash DCA(Direct Cellular Amplification)one step RT qPCR (SYBR Green)kit
无需额外提取RNA和逆转录
10个细胞可直接测qPCR
广谱适用
强力去除腐殖酸
货号:400-106
产品保存
室温(15-25℃) 运输保存,保质期为一年。
产品简介
本试剂盒适用于从简单植物组织中快速提取总RNA 。可以进行各种简单的植物组织(如水稻、小麦、玉米、拟 南芥、本生烟等植物幼嫩组织)的RNA提取。本试剂盒提取过程中无需使用酚氯仿、β-巯基乙醇等有毒试剂,
也无需耗时的醇类沉淀,整个提取过程只需11分钟。本试剂盒中的特异性gDNA清除柱能有效地去除杂质和 gDNA ,RNA结合柱能高效地结合RNA ,同时配备优化后的Buffer ,可以得到高纯度的总RNA 、且gDNA残留 少、无蛋白和其他杂质污染。RNA产物可用于RT-PCR 、荧光定量PCR 、RNA建库、芯片分析、Northern Blot、 Dot Blot和分子克隆等多种下游实验。
效果实测:
样本 |
样本量(mg) |
洗脱体积(μl) |
A260/A280 |
A260/A230 |
浓度(ng/ul) |
得率(μg/mg) |
烟草 |
75 |
60 |
2.169 |
2.241 |
563.428 |
0.45 |
黄瓜 |
73 |
60 |
2.138 |
2.429 |
370.856 |
0.30 |
花叶万年青 |
76 |
60 |
2.071 |
1.573 |
187.405 |
0.15 |
龟背竹 |
100 |
50 |
2.062 |
2.328 |
271.424 |
0.14 |
拟南芥 |
100 |
30 |
2.09 |
2.262 |
656.911 |
0.20 |
大豆茎 |
100 |
30 |
2.049 |
1.979 |
305.634 |
0.09 |
玉米叶 |
30 |
30 |
2.122 |
2.218 |
514.922 |
0.51 |
大豆根 |
80 |
30 |
2.108 |
2.058 |
372.614 |
0.14 |
产品组成
产品编号 |
组分 |
(50次) |
400-106A |
Lysis Buffer |
40 mL |
400-106B |
CB Buffer |
20 mL |
400-106C |
Wash Buffer |
12 mL |
400-106D |
Elution Buffer |
10 mL |
400-106E |
gDNA清除柱(含收集管) |
50套 |
400-106F |
RNA结合柱(含收集管) |
50套 |
实验前准备事项
使用说明
称取 50~ 100 mg 植物组织,加入液氮后用研钵磨成粉末,或液氮速冻后用冷冻研磨仪快速将样品研磨成粉末。 研磨应尽可能充分快速,并保证低温,以防止 RNA 降解。
迅速向研磨好的植物样品粉末中加入 600 μL 的 Lysis Buffer ,剧烈涡旋振荡 30 秒,使样本与裂解液充分混合 均匀,然后 13,000 × g 室温离心 5 min。
弃去沉淀,将上一步离心后的上清立即转入 gDNA 清除柱(清除柱先套入收集管中),13,000 × g 室温离心 30 秒。产物在收集管中,保留收集管中的滤液。
向收集管中加入 0.5 倍滤液体积的无水乙醇,用移液器吹打 6-8 次混匀,然后将混合液转入 RNA 结合柱(结 合柱先套入收集管中),13,000 × g 室温离心 30 秒。
1) 弃滤液,向 RNA 结合柱(含收集管)中加入 700 μL 的 CB Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙 醇),13,000 × g 室温离心 30 秒。
2) 弃滤液,向 RNA 结合柱(含收集管)中加入 500 μL 的 Wash Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙 醇),13,000 × g 室温离心 30 秒。
3)重复上述步骤 2)一次。
4) 弃滤液,将 RNA 结合柱放回收集管。13,000 × g 室温空管离心 1 分钟。
1) 弃收集管,将 RNA 结合柱转入新的 1.5 mL 的 RNase-free 离心管中,超净台最大风速开盖晾干 1 分钟。
2) 向吸附柱膜中央悬空滴加 30 - 100 μL 的 Elution Buffer ,13,000 × g 室温,离心 1 分钟。1.5 mL 离心管 中产物即为 RNA 产物,立即进行下游实验或置于-80℃保存。
注意事项