分子生物学



信天翁生物(GOONIE)重磅推出全新产品——线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒(货号:100-118)!通过高灵敏度荧光探针技术,为您提供精准、便捷的MPTP开放程度检测方案。
线粒体膜通透性转换孔(Mitochondrial Permeability Transition Pore, mPTP)是线粒体内外膜之间存在一组蛋白复合体,这是一种非特异性通道。线粒体通透性转换孔的开关与细胞的生存、凋亡有关,在一些神经退行性疾病、药物毒理学等研究有广泛的应用。
通过荧光强弱变化,清晰反映MPTP开放程度,助力您的科研数据分析。
Calcein AM进入细胞后,在细胞质(包括线粒体) 中累积。细胞内的酯酶水解作用可以使原本无荧光信号的Calcein AM生成无膜通透性的极性荧光染料钙黄绿素(Calceinor Fluorexon) ,发强绿色荧光。Calcein 是金属络合指示剂,若与 Co²⁺等金属离子结合,荧光会被淬灭。
在正常健康的细胞里,线粒体的 MPTP 保持关闭状态,这个时候的CoCl₂无法进入线粒体,所以经 Calcein AM 染色并用 CoCl₂处理后,细胞质的荧光会被淬灭,只有线粒体里的Calcein 保持绿色荧光。
如果在这个时候用钙离子载体 Ionomycin 诱导细胞外的Ca²⁺进入细胞及线粒体, MPTP 将少量或大量开放。
此时,线粒体里的部分 Calcein 会释放到细胞浆,在细胞质遇到钴离子,与之结合失去荧光,同时钴离子也会进入线粒体,使线粒体内 Calcein 的绿色荧光部分甚至全部淬灭,最终线粒体的绿色荧光减弱或消失。
通过观察线粒体中绿色荧光的强弱,即可判断线粒体 MPTP 的开放程度:荧光越强,MPTP开放程度越低;荧光越弱,MPTP开放程度越高。


A组细胞仅加入Calcein AM:线粒体和细胞质都有绿色荧光信号,信号较强;
B组细胞加入Calcein AM和CoCl2:只有线粒体有绿色荧光,荧光强度中等;
C组细胞加入Calcein AM、CoCl2和Ionomycin:线粒体和细胞质绿色荧光均被淬灭,荧光信号比较弱或者几乎没有。
未染为阴性对照。
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